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Mar 06, 2023

유연하고 제어 가능한 차세대 CAR T 치료법(3부)

범용 어댑터와 결합하면 SynNotch 셀을 미세하게 제어할 수 있습니다.

SynNotch 세포는 CAR T 및 기타 ... [+] 세포 치료용 범용 어댑터와 결합하면 정밀하게 제어할 수 있습니다.

이것은 대체 CAR T 치료법에 관한 시리즈의 마지막 기사입니다. 1부에서는 범용 어댑터를 사용하는 CAR T 버전을 설명합니다. 2부에서는 대체 CAR T 치료법인 SNAPtag를 소개합니다. CAR T 치료법에 대한 자세한 내용을 보려면 웹사이트 www.williamhaseltine.com을 방문하세요.

이전 기사에서 우리는 synNotch 수용체에 의존하는 대체 세포 치료법을 설명했습니다. 이러한 합성 수용체는 특정 입력에 반응하여 원하는 세포 반응을 생성합니다. 이 모듈식 설계는 보다 잘 확립된 CAR T 치료법보다 더 큰 치료 유연성을 약속합니다. SNAPtag라는 범용 어댑터와 통합하면 디자인이 더욱 향상됩니다. 여기에서는 University of Pittsburgh의 연구원들이 이 synNotch-어댑터 듀오를 개발한 방법과 작동 방식을 설명합니다.

SynNotch와 범용 어댑터

SynNotch 세포는 전사 인자에 의존하여 유전자를 변경하는 반면, CAR T 세포는 T 세포 신호 계통을 유발합니다. 서로 다른 메커니즘에 의존함에도 불구하고 두 치료법은 비슷한 한계를 공유합니다. 둘 다 제어하기 어렵고 한 번에 하나의 항원만 표적으로 삼을 수 있습니다. 이를 위해 Ruffo와 동료들은 CAR T 세포뿐만 아니라 synNotch T 세포에서도 작동하는 어댑터를 개발하려고 했습니다.

이론적으로 어댑터는 수용체와 표적 항원 사이에 다리를 만들어야 합니다. 이러한 방식으로 synNotch 세포에 어댑터를 사용하면 치료법이 동시에 또는 순차적으로 여러 항원을 표적으로 삼을 수 있습니다. 동일한 태그가 있는 새로운 항체를 도입하여 항원 표적을 전환할 수도 있습니다. 그리고 제어를 위해 중요한 것은 어댑터 농도를 변경하거나 경쟁 억제제로 태그를 도입하여 치료를 중단하거나 강화할 수 있다는 것입니다.

범용 어댑터

이전에 설명한 것처럼 범용 어댑터는 항체와 벤질구아닌(BG) 태그라는 두 가지 핵심 요소로 구성됩니다(그림 1). 태그는 공유 결합을 통해 synNotch 수용체의 세포외 부분에 영구적으로 고정됩니다. 한편, 항체 꼬리는 표적 세포의 특정 항원을 감지하고 결합합니다. 항원 결합은 synNotch 수용체를 확장하고 핵심 단백질의 절단 부위를 드러냅니다. 그림 2에서 볼 수 있듯이 효소는 절단 부위를 절단하고 전사 인자를 세포의 세포내 도메인으로 방출합니다. 전사 인자는 핵으로 이동하여 표적 유전자의 발현에 영향을 미칩니다.

그림 1: 범용 어댑터는 항체와 벤질구아닌(BG) 태그라는 두 가지 구성 요소에 따라 달라집니다. ... [+] 태그는 synNotch 수용체에 공유결합하는 반면, 항체는 특정 항체 표적에 결합합니다. 동일한 태그를 다양한 항체에 융합할 수 있으므로 synNotch 수용체가 다양한 종류의 항원 표적에 반응할 수 있습니다.

그림 2: SynNotch 수용체는 범용 어댑터가 있는 경우 CAR T 세포와 다른 경로를 유발합니다. 어댑터 태그가 수용체(및 표적 항원에 대한 어댑터 항체)에 결합되면 기계적 당기는 힘으로 수용체가 늘어나고 코어 단백질의 절단 부위가 노출됩니다. 절단은 전사 인자를 방출하고 핵 내부에서 표적 유전자를 활성화시킵니다.

적응된 SynNotch가 작동합니까?

SynNotch 수용체 기능은 각각 뚜렷하고 임상적으로 관련된 항체로 구성된 4가지 유형의 어댑터를 사용하여 테스트되었습니다(표 1 참조). synNotch 세포를 해당 종양 세포와 함께 배양하고 다양한 농도의 어댑터에 노출시켰습니다. 48시간 후, 유전자 발현을 측정하기 위해 유동 세포측정법을 사용하여 세포를 분석하였다. 어댑터 분자가 한쪽은 종양 세포에 성공적으로 결합하고 다른 쪽은 synNotch 수용체에 성공적으로 결합하면 표적 유전자 발현이 증가해야 합니다.

표 1: 범용 어댑터를 테스트하는 데 사용되는 항체 목록. 각 항체는 종양 세포에서 발견되는 특정 ... [+] 항원을 표적으로 삼습니다.